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  • 丛枝菌根真菌对大叶女贞耐盐性的材料和方法
  • 发布日期:[2020/06/28]
  • 1.1试验材料

    试验于2020年4 月在承德市林业局苗圃进行。供试植物为大叶女贞,购自世博林业;供试丛枝菌根真菌为摩西球囊霉菌( Glomus mosseae) ,由中国农业科学院 植物保护研究所提供;供试分析纯 NaCl 购自北京市通广精细 化工有限公司。将大叶女贞幼苗栽植于45 cm × 40 cm( 长 × 宽) 花盆中,每盆定植1 株,栽培基质为改良土壤基质。缓苗期为1 个月,其间进行正常的水分、养分管理及病虫害防治。 2017 年5 月从定植苗中选取长势、大小一致的大叶女贞苗木进行盐胁迫试验。

    1.2 试验方法

    1.2.1 试验设计 试验共设丛枝菌根真菌和盐胁迫2 个因 素,丛枝菌根真菌设 2 个水平,分别在定植前接种20 g 丛枝 菌根真菌和20 g 经高温灭菌的丛枝菌根真菌( CK) ; 盐胁迫 试验共设6 个水平,分别将 NaCl 浓度设置为 0、3、6、9、12、15 mg/g。试验设丛枝菌根真菌( 处理与对照) × NaCl 浓度( 6 水 平) 共12 个处理,每个处理重复10 盆,共120 盆,随机区组设 计。为避免盐冲击效应, NaCl 浓度每天按 3 mg/g 梯度递增, 直至达到各处理预定浓度,然后每隔3 d 按预定盐浓度浇灌1 次,浇灌量为300 mL。

    1.2.2 项目测定及方法 盐胁迫处理 60 d 后,对大叶女贞 进行各数据指标测定。根系菌根侵染率测定采用 Phillips 等 的方法,菌根侵染率 = 侵染菌根段数/检测菌根段数 × 100%;生物量主要测定大叶女贞的株高、茎粗、地径和总干质 量;采用相对电导法( relative conductance,简称 RC) 测定叶片 细胞膜透性; MDA 含量测定采用硫代巴比妥酸比色法; 分别 采用抑制硝基四氮唑蓝( nitrotetrazolium blue chloride,简称 NBT) 光还原比色法、愈创木酚法和紫外分光光度法对 SOD、 POD 和 CAT 活性进行测定; Pro 含量测定采用磺基水杨酸提 取法和可溶性糖( SS) 含量测定采用蒽酮比色法; 可溶性蛋白 ( SP) 含量采用考马斯亮蓝 G-250 法进行测定。

    1.2.3 数据分析 采用 Excel 2010 软件进行试验数据整理、 计算及作图,差异显著性分析采用 SPSS 18.0 进行。




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